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液相柱選擇的簡單思路:
1.確定分離目的確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命,低的操縱本錢等等。
2.評估分析物的化學性質評估分析物的化學性質..諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。
3.選擇合適的色譜柱了解色譜填料的物理和化學性質。
液相柱的使用說明:
( 1 ) 使用前注意事項:
液相柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意液相柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩衝液作洗脫劑,應先用10 %左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩衝液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
( 2 ) 流動相:
流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm 的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜係統中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規矽膠為基質的鍵合相填料通常的 ph 值適用範圍是 2.0-8.0 , bds c18 適合於堿性化合物, ph值適用範圍為 2.0-10.0 。當必須要在 ph值適用範圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結束後立即用適合於色譜柱儲存並與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,並完全置換掉原來所使用的流動相。
( 3 ) 樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預處理柱( spe)對樣品進行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時,所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。
保護柱是液相柱的防彈衣,使用保護柱可大大降低分析柱受汙染的程度,延長分析柱使用壽命。
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